实时荧光定量RT-PCR检测糖皮质激素α-受体mRNA表达水平方法的建立

摘要：

建立用荧光定量RT-PCR的方法检测人糖皮质激素α-受体(GR-α)mRNA水平的标准曲线.根据人糖皮质激素α-受体mRNA序列(GeneBank No. NM_000176)设计引物,反转录出cDNA,再插入到PMD18-T载体中.再根据cDNA设计引物和探针,采用TaqMan探针荧光定量RT-PcR的检测方法,构建人GR-α基因表达量的标准曲线.由PMD18-T-GR-α所构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含1×101-1×105拷贝数的人GR-α基因分子时,扩增反应Ct值与拷贝数的对数呈较好的线性关系)、灵敏度高(可检测出低于10个拷贝/μL的样品)、特异性强、准确可靠.

关键词：TaqMan探针、荧光定量RT-PCR、标准曲线

所属期刊栏目：30

分类号：Q785;S565.403.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省教育厅青年资助项目Q200712005;长江大学博士启动基金0364

在线出版日期：2008-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：294-297