克鲁维酵母中外切菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达研究

摘要：

用PCR的方法从克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)ATCC12424中克隆出外切菊粉酶基因.将该基因克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905C、pHBM906上,构建了外切菊粉酶毕赤酵母表达载体pHBM1200、pHBM1201.将两者转化毕赤酵母GS115,得到重组菌株GS115(pHBM1200)、GS115(pHBM1201),将这两种重组菌株进行摇瓶发酵,测得带α-信号肽的菌株GS115(pHBM1200)表达的外切菊粉酶最高酶活为89.43 U/mL,带自身信号肽的菌株GS115(pHBM1201)表达的外切菊粉酶最高酶活为14.828 U/mL.SDS-PAGE电泳表明,外切菊粉酶的表观分子量为90 kD.将外切菊粉酶用去糖基化酶endoH处理后,SDS-PAGE电泳表明,分子量为60 kD,和预计的分子量一致.

关键词：外切菊粉酶、克鲁维酵母、毕赤酵母、基因表达

所属期刊栏目：28

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省科技攻关项目2003AA101C22

在线出版日期：2007-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：385-388