枯草芽孢杆菌寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的表达研究

摘要：

根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因序列设计引物,以pHBM003为模板,扩增得到寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因,克隆至毕氏酵母(Pichia pastoris)表达载体pHBM905上,获得重组毕氏酵母表达载体pHBM9053.将此质粒分别转化毕氏酵母GS115、KM71和SMD1168菌株,筛选获得重组毕赤酵母GS115(pHBM9053)、KM71(pHBM9053)和SMD1168(pHBM9053);然后进行摇瓶诱导培养,这3株毕氏酵母分别在诱导培养60 h、48 h和24 h后,酶活力达到最高,对应为2.233 u/mL、0.34 u/mL和1.235 u/mL;GS115(pHBM9053)所产寡聚-1,6-葡萄糖苷酶的最适反应温度为75 ℃,最适反应pH值为6,在30～75 ℃、pH 8～9范围内较稳定.

关键词：寡聚-1、6-葡萄糖苷酶、枯草芽孢杆菌、毕赤酵母、基因表达

所属期刊栏目：27

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省科技攻关项目2003AA101C22

在线出版日期：2005-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：272-274,279