重组纳豆激酶的分离纯化及酶学性质的初步研究

摘要：

将已构建好的表达载体pTYB102转化大肠杆菌,经IPTG诱导,表达出以可溶形式存在的有活性的纳豆激酶.首先对表达条件进行优化,最佳诱导温度是15 ℃,最佳诱导时间是10 h.然后将离心收集到的菌体通过超声波破碎、硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100柱层析以及冷冻干燥等步骤进行分离纯化,得到电泳纯的有溶栓活性的纳豆激酶.冷冻干燥品在SDS-PAGE上呈一条蛋白质带.纯化倍数35倍,纯酶比活1 147.54.该酶的最适反应条件是45 ℃,pH 8.0.酶活性在pH 6.0～11.0,55 ℃以下稳定.

关键词：纳豆激酶、大肠杆菌、分离纯化、酶学性质

所属期刊栏目：26

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省科技厅自然科学基金2003ABA116

在线出版日期：2004-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：57-60