10.13210/j.cnki.jhmu.20200728.002
探讨嵌合内含子对非小细胞肺癌细胞系PC-9上皮间质转化的影响
目的:探讨嵌合内含子(chimeric intron)对人非小细胞肺癌PC-9细胞株上皮间质转化(EMT)的影响和作用.方法:以psiCHECK-2质粒为基本框架,插入嵌合内含子构建出psiCHECK-2-Intron双荧光素酶报告基因重组质粒载体,再将psiCHECK-2-Intron和psiCHECK-2分别转染至PC-9细胞中,通过双荧光素酶活性快速检测该重组质粒载体在真核细胞中的表达情况,然后分别应用细胞划痕实验和Matrigel侵袭实验观察PC-9细胞迁移和侵袭能力的变化,再通过qRT-PCR以及Western-Blot-ting检测EMT相关分子标志物:N-钙黏蛋白(N-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)以及转录因子Snail表达水平的改变.结果:与对照组相比,Intron组PC-9细胞的侵袭能力明显降低(P<0.001),N-cad-herin、β-catenin和Snail等相关分子标志物的表达量明显下调(P<0.001).结论:嵌合内含子能够抑制非小细胞肺癌PC-9细胞株的EMT转化,其作用机制可能与N-cadherin、β-catenin和Snail表达量下调有关.
psiCHECK-2、嵌合内含子、PC-9、双荧光素酶报告基因、非小细胞肺癌(NSCLC)、上皮间质转化(EMT)
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R734.2(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81660474
2021-02-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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