小鼠原代血管平滑肌细胞改良分离方法的建立

摘要：

目的:建立方便、快速、高效的小鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的分离培养方法,为相关研究提供快速获取原代VSMC的方法技术.方法:分离小鼠主动脉,用Ⅰ型胶原酶消化血管组织去除内皮细胞等杂细胞;将血管切成1 mm2大小组织块种植于六孔细胞培养板孔底,用分离培养液诱导原代VSMC细胞的繁殖生长.光学显微镜观察细胞形态特征;免疫组化方法鉴定VSMC特异性蛋白α-SMA的表达;RT-PCR方法检测VSMC特异性蛋白α-SMA和SM22α的mRNA表达水平.结果:本方法分离原代VSMC,3d后可见长梭状VSMC从组织块边缘长出,7d后可以进行传代.光学显微镜观察显示,分离细胞具有平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)形态特征;免疫组化分析显示,分离细胞α-SMA蛋白表达阳性;RT-PCR分析显示,分离细胞中a-SMA和SM22α在mRNA水平高表达.结论:本实验成功建立了一种简便、快捷、高效从组织块分离培养VSMC的改良方法,为快速获得原代VSMC提供了一种适用的方法技术.

关键词：小鼠动脉血管、血管平滑肌细胞、组织块培养方法、原代细胞培养

所属期刊栏目：20

分类号：R329-3(人体形态学)

资助基金：四川省科技厅应用基础项目2006J13-031.Supported as a basic project by Sichuan Provincial Science and Technology Department grant 2006J13-031

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：302-306,312