视网膜发育基因Six3表达载体的构建

摘要：

目的:Six3在视网膜发育中起着关键性的调节作用,然而商品化的Six3 表达载体尚鲜见,本研究拟以 pBaBb-puro为骨架,构建Six3真核表达载体.方法:以新生乳鼠眼 cDNA 为模板,通过 PCR扩增出Six3 编码序列,经酶切后,用T4 DNA连接酶将其与pBaBb-puro进行连接,经过转化、筛选后,进行酶切和测序鉴定.结果:经RT-PCR 扩增获得了含1002bp的Six3基因编码序列,经过酶切、连接、转化后,挑选 12 个菌落进行PCR检测,筛查到9个菌落含有重组质粒,对其中2个菌落进一步行酶切和测序鉴定,结果与理论预期完全相符.结论:成功构建了pBaBb-puro-Six3 真核表达载体,为进一步研究 Six3 的功能奠定了基础.

关键词：Six3、视网膜、pBaBb-puro、表达载体、鼠

所属期刊栏目：17

分类号：R774.1(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金30973266、30672275;眼科学国家重点实验室青年基金QN-01;湛江师范学院博士专项资金:ZL1014

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：289-291