LncRNA-H19靶向miR-654-5p对人骨髓间充质干细胞成骨分化的促进效应研究

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA H19(LncRNA-H19)靶向miR-654-5p对人骨髓间充质干细胞成骨分化的促进效应.方法 选取20只SPF级5～6周龄近交系BALB/c小鼠,分离及培养骨髓间充质干细胞,采用随机数表法分为阴性对照组、LncRNA-H19转染组和LncRNA-H19抑制组,LncRNA-H19转染组转染LncRNA-H19慢病毒载体、LncRNA-H19沉默质粒.采用MTT法检测细胞增殖,测定各组碱性磷酸酶活性(ALP),荧光素报告基因实验验证LncRNA-H19靶向miR-654-5p作用,Western blot检测BMP-2、OCN蛋白表达.结果 阴性对照组、LncRNA-H19转染组和LncRNA-H19抑制组细胞培养0 h、24 h、48 h及72 h时OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);LncRNA-H19转染组ALP活性值为(13.11±1.92)U/gprot,明显高于阴性对照组的(9.65±1.12)U/gprot和LncRNA-H19抑制组的(5.30±1.20)U/gprot,差异均有统计学意义(P<0.05);LncRNA-H19转染组miR-654-5p-3'UTR调节的荧光素酶活性为0.612±0.099,明显低于阴性对照组的1.010±0.100和LncRNA-H19抑制组的1.453±0.102,差异均有统计学意义(P<0.05);各组miR-654-5p-突变型3'UTR调节的荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05);LncRNA-H19转染组BMP-2、OCN蛋白相对量为1.102±0.102、1.242±0.088,明显高于阴性对照组的0.493±0.100、0.372±0.094和LncRNA-H19抑制组的0.202±0.082、0.182±0.092(P<0.05).结论 LncRNA-H19通过靶向miR-654-5p促进人骨髓间充质干细胞向成骨分化,可能与调控MMP-2、OCN蛋白表达有关.

关键词：长链非编码RNA H19;miR-654-5p;靶向作用;人骨髓间充质干细胞;成骨分化

所属期刊栏目：32

分类号：R329.2+1(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金我编号:81601896

在线出版日期：2021-08-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1769-1772