10.3969/j.issn.1003-6350.2017.23.002
SNAI2在结直肠癌中的表达及其对细胞增殖和侵袭能力的影响
目的 明确锌指转录因子2(SNAI2)在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 收集海南省人民医院胃肠外科2015年9月至2016年4月间收治的50例临床结直肠癌组织样本及癌旁组织,使用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测其中SNAI2的表达水平,t检验比较两组SNAI2水平的差异.针对SNAI2基因,设计四组干扰RNA序列和一组无任何靶向位点的随机插入序列.将各组序列剪切到慢病毒载体上,用二代包装系统包装成慢病毒悬液.将HT29接种至6孔板,分别标记为对照组、shSNAI21#组、shSNAI22#组、shSNAI23#组、shSNAI24#组.对照组注入插入随机序列载体的慢病毒悬液,shSNAI21#组、shSNAI22#组、shSNAI23#组、shSNAI24#组分别注入插入四组干扰RNA序列的慢病毒悬液.挑选SNAI2表达最高的SW480细胞系进行慢病毒感染,获得稳定knock-down SNAI2细胞系.在高表达SNAI2的SW480细胞系中,采用慢病毒感染的方法构建稳定干扰SNAI2细胞株.通过噻唑蓝(MTS)比色法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞侵袭迁移能力.同时Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 癌旁组织SNAI2的表达量低于结直肠癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,细胞黏附分子E-cadherin表达量升高,细胞骨架蛋白、Vimentin表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);siSNAI2的SW480细胞系中,与对照组比较,细胞增殖能力、侵袭能力显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SNAI2在人结直肠癌中表达量升高,作为一种癌基因,其可促进结直肠癌细胞的体外增殖、侵袭和体内转移能力.
SNAI2、结直肠癌、细胞增殖、细胞侵袭
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R735(肿瘤学)
2014年海南省应用技术研发与示范推广专项ZDXM2014066
2018-01-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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