肺动脉平滑肌细胞上TMEM16A的表达及其阻滞剂对细胞增殖的作用

摘要：

目的：研究TMEM16A在大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)上的表达及其阻滞剂(T16Ainh-A01)对PASMCs增殖的作用。方法组织块贴壁法分离正常大鼠PASMCs，原代培养。光镜下观察细胞形态，细胞免疫化学和细胞免疫荧光进行鉴定。细胞免疫荧光检测TMEM16A在PASMCs上表达。原代培养的3~6代PASMCs分别在10μmol/L T16Ainh-A01、20μmol/L T16Ainh-A01和50μmol/L T16Ainh-A01下培养24 h，用CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜下PASMCs以长梭形为主，细胞核卵圆形，部分细胞重叠区域呈典型的“峰-谷”状结构。免疫学检测显示胞浆内与细胞长轴平行的肌丝被染成棕黄色，标记肌丝的红色荧光也与细胞长轴平行，标记细胞膜上的TMEM16A的绿色荧光可见表达，而细胞核不染色。CCK-8实验检测，相对于对照组，10μmol/L T16Ainh-A01组细胞活力均数为(96.74±0.92)%，20μmol/L T16Ainh-A01组均数为(92.21±1.25)%，50μmol/L T16Ainh-A01组均数为(87.41±3.27)%，差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论正常大鼠PASMCs表达TMEM16A；T16Ainh-A01可抑制PASMCs增殖，其抑制作用呈浓度依赖性；TMEM16A可能参与调控PASMCs增殖。

关键词：TMEM16A、肺动脉平滑肌细胞、阻滞剂、细胞增殖、原代培养

所属期刊栏目：27

分类号：R-332(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金编号81160040；广西自然科学基金编号2013GXNSFAA019177

在线出版日期：2016-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1727-1730