10.3969/j.issn.1003-6350.2015.18.0969
皮质酮浓度对SD大鼠成骨细胞成骨基因表达的影响
目的:探讨皮质酮对离体SD大鼠成骨细胞功能的影响。方法采用多次胶原酶组织消化法获得新生SD大鼠颅骨中的成骨细胞作为研究对象,用倒置显微镜及碱性磷酸酶、钙结节染色观察成骨细胞形态, CCK-8法检测皮质酮对成骨细胞增殖的影响,根据CCK-8结果将SD大鼠成骨细胞分成四组,分别用含不同浓度的皮质酮(0μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L)的DMEM(H)培养基培养,作用24 h后,测定成骨细胞内碱性磷酸酶含量,采用RT-PCR检测成骨细胞内COL1A、OCN、ALP基因表达,采用Western blot检测成骨细胞内COL1A、OCN、RUNX-2蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示皮质酮能抑制成骨细胞的增殖,皮质酮能抑制成骨细胞内碱性磷酸酶的生成,与浓度明显相关;RT-PCR与Western blot检测可见COL1A、OCN、ALP基因表达及COL1A、OCN、RUNX-2蛋白的表达下降。结论皮质酮在超生理剂量的浓度下能抑制成骨细胞增殖及细胞内碱性磷酸酶的合成,减少COL1A、OCN、ALP基因及COL1A、OCN、RUNX-2蛋白的表达。
皮质酮、成骨细胞、基因表达、成骨
R-332(医学研究方法)
广东省科技计划项目编号2011B031800172
2015-10-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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