卵形鲳鲹TNFSF6的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备

摘要：

为了研究卵形鲳鲹肿瘤坏死因子配体6(TNFSF6)的功能,本研究构建了TNFSF6的原核表达载体并制备了其多克隆抗体,首先通过PCR扩增技术扩增获得了TroTNFSF6的开放阅读框序列,并构建了原核表达重组质粒pET-TroTNFSF6,随后将重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21中,进行原核表达并获得重组蛋白rTroTNFSF6.结果显示,重组蛋白rTroTNFSF6大小约46.5 kDa,其最适诱导温度为20℃,诱导时间为8h,IPTG的最佳浓度为0.6 mmol/L可溶性分析表明,重组蛋白rTroTNFSF6主要在沉淀中,以包涵体的形式存在.将纯化后的重组蛋白rTroTNFSF6免疫小鼠以制备多克隆抗体,ELISA检测结果表明其效价高达1∶32 000.本研究为进一步探究卵形鲳鲹TNFSF6的功能奠定了基础.

关键词：卵形鲳鲹、肿瘤坏死因子配体、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：38

分类号：Q78;S917.4(基因工程（遗传工程）)

资助基金：海南省自然科学基金;海南省南海名家青年项目;海南大学科研平台建设项目;国家海洋局海洋经济创新示范城市项目

在线出版日期：2020-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：153-158