重组嵌合生长抑素工程菌的构建、表达与免疫

摘要：

将动物生长抑素(SS)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合基因插入pET28a系统,构建重组质粒pET28a-A4030-2-LTB并转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,获得了大肠杆菌表达菌株BL21(DE3) pET28a-A4030-2-LTB,然后使用SDS-PAGE检测该融合蛋白的表达并优化其发酵与包涵体洗涤条件,接着采用亲和层析法进行纯化,并用Western Blotting技术检测该融合蛋白的免疫原性.研究结果表明,在37℃,加入1 mmol/L的IPTG培养3h后,融合蛋白的表达量最高且稳定表达;在包涵体洗涤的过程中,使用含有ψ=1％的TritonX-100、2 mol/L尿素和0.5 mol/L NaC1的缓冲液洗涤包涵体沉淀,其效果最佳,用Western Blotting方法检测出该蛋白能发生抗原抗体反应,并且将重组蛋白免疫7只小鼠后,其中有6只小鼠产生了抗SS抗体,表达产物具有免疫原性.此研究为进一步开发生长抑素基因工程疫苗提供了可靠的实验依据.

关键词：生长抑素疫苗、融合蛋白、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q939.91(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金31560261;海南省自然科学基金818MS039

在线出版日期：2018-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：110-116