乙型肝炎病毒拉米夫定耐药株的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系的建立

摘要：

目的 构建1.3拷贝乙型肝炎病毒(HBV)拉米夫定耐药株的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系.方法 在野毒株1.3拷贝HBV载体的基础上采用定点突变的方法将rtL180M,rtM204V位点突变,构建拉米夫定耐药病毒株,并通过PCR、限制性内切酶酶切,分别以正向和反向将野毒株和耐药株分别连接于逆转录病毒载体pLNCX2的相应酶切位点,构建成重组逆转录病毒载体,经双酶切及PCR扩增鉴定.重组载体转染包装细胞,筛选培养细胞克隆并进行病毒滴定.结果 通过双酶切、PCR扩增、测序鉴定证实成功构建了1.3拷贝HBV拉米夫定耐药株的逆转录病毒载体.成功建立包装细胞系并测得病毒滴度均为1×105 cuf/ml.结论 含正向及反向1.3拷贝HBV拉米夫定耐药的重组逆转录病毒载体及其包装细胞系构建成功,可以用于拉米夫定耐药细胞模型研究.

关键词：乙型肝炎病毒、拉米夫定耐药、逆转录病毒载体、包装细胞系

所属期刊栏目：12

分类号：R5(内科学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2005CB523104

在线出版日期：2008-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：469-471