丹参不同愈伤组织诱导及遗传转化体系优化

摘要：

为了获得满足不同目的组织培养材料和稳定高效的遗传转化体系,该研究以丹参叶片和茎段为外植体,采用含不同浓度的植物激素(植物生长物质)的Murashige Skoog( MS)培养基,探索诱导丹参产生不同愈伤的条件；采用正交法考察浸染时间、共培养时间、筛选压等对农杆菌介导的丹参遗传转化体系的影响,并根据出芽率及转化阳性率优化丹参遗传转化体系。结果表明：(1)能较快诱导丹参叶片产生愈伤的是MS＋0.5 mg?L￣16￣BA＋0.5 mg?L￣12,4￣D；诱导茎较快产生愈伤的是MS＋0.1mg?L￣1 NAA＋0.5 mg?L￣16￣BA；1 mg?L￣1反式玉米素( ZR)可能有利于诱导产生含有丹参酮的愈伤组织；1.0 mg?L￣12,4￣D较易诱导丹参愈伤组织生根。(2)以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件为浸染5 min、共培养1 d、卡那霉素30 mg?L￣1筛选,经PCR鉴定转基因阳性率为60％；而用10 mg?L￣1链霉素筛选阳性率达70％。该研究结果确定了丹参不同愈伤组织诱导条件,明确了以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件,换用10 mg?L￣1链霉素筛选时体系更加稳定、更易操作、更易重复。

关键词：丹参、愈伤、诱导、遗传转化

所属期刊栏目：37

分类号：Q943.1;Q94￣336(植物学)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金20111106110033[Supported by the Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education of China20111106110033]。

在线出版日期：2017-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：102-108