板栗疫病菌致病性机理的双向凝胶电泳法研究

摘要：

双向凝胶电泳技术是蛋白质组学研究的基础性技术平台.如何得到一张高质量的双向凝胶电泳图谱是进行后续研究的关键.为探索适用于板栗疫病菌可溶性总蛋白的最佳提取条件,从蛋白组学角度来探索板栗疫病菌致病性机理,比较了目前在丝状真菌中常用的两种蛋白质提取方法,制备的蛋白质样品经双向凝胶电泳后,在凝胶上呈现的蛋白质斑点的丰度和分布特点.结果表明,两种方法获得的蛋白质主要集中分布在pH4～7的范围内;TCA-丙酮沉淀法得到的图谱分辨率高但是蛋白质总量很少.裂解液-TCA-丙酮沉淀法得到的蛋白质总量较大,通过cleanup kit处理后图谱分辨率可以达到差异蛋白组的要求.随机提取几个银染蛋白点用MALDI-TOF MS/MS进行分析,可以得到高质量的肽质量指纹谱.表明该样品制备方法可以满足蛋白质鉴定的要求.

关键词：蛋白质提取、双向凝胶电泳、蛋白质组、板栗疫病菌

所属期刊栏目：28

分类号：Q945.8(植物学)

资助基金：国家自然科学基金30130020;广西自然科学基金0229001

在线出版日期：2008-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：117-120