丁烯醛对动脉内皮细胞氧化损伤的蛋白组学研究与生物信息学分析

摘要：

目的 通过同位素标记相对与绝对定量蛋白质组学技术筛查丁烯醛导致人动脉内皮细胞损伤进程中的氧化损伤相关蛋白标记物.方法 根据细胞活力损伤曲线确定导致90％细胞损伤所需的丁烯醛药物浓度(LD90).利用蛋白质组学技术检测丁烯醛处理和未处理过的人动脉内皮细胞的蛋白质表达情况;采用生物信息学手段分析蛋白质数据;使用平行反应监测技术进行蛋白标记物的验证;通过检测线粒体膜电位与分光光度法测谷胱甘肽活性验证目标蛋白改变对氧化损伤功能的影响.结果 以倍数变化＞1.5的标准(上调＞1.5倍或者下调至＜67％)共鉴定出153个差异表达蛋白,其中氧化损伤相关差异表达蛋白质共12种:传感蛋白(A0A2P9AJA0)、激活信号辅整合素1复合体亚基2(B1AH59)、烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶 1(B1AN62)、cDNA FLJ58404(B4DRL9)、cDNA FLJ55250(B4DV58)、cDNA FLJ55007(B4DY35)、氧化酶(细胞色素 1)装配蛋白样 1(E7EVY0,OXA1L)、电子转移黄素蛋白α亚单位(H0YL12)、细胞色素C氧化酶亚基6A(O95101)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(P48507)、细胞色素C氧化酶装配因子4(Q9NYJ1)、39S核糖体蛋白L3(P09001).基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示差异蛋白明显富集的生物过程与碳水化合物、脂肪酸等有机物的代谢有关,而代谢过程则与ATP的产生、代谢氧化产物的产生和集聚、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)的相互作用等密切相关.丁烯醛作用于人动脉内皮细胞后线粒体膜电位出现明显降低,谷胱甘肽活性出现了明显下降.蛋白网络互作结果显示,OXA1L、电子转移黄素蛋白亚单位α(ETFA)、线粒体核糖体蛋白L3(MRPL3)及谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚单位(GCLM)为4个关键的候选蛋白质.结论 丁烯醛改变了人动脉内皮细胞的氧化损伤相关蛋白表达模式,表现为OXA1L、ETFA、GCLM蛋白表达升高,MRPL3表达下降.

关键词：丁烯醛、动脉内皮细胞、氧化损伤相关蛋白、蛋白组学技术、生物信息分析

所属期刊栏目：31

分类号：R285.5;R332;R943

资助基金：河南省医学科技攻关计划联合共建项目;河南省医学科技攻关计划联合共建项目;河南省医学科技攻关计划联合共建项目;新乡医学院第一附属医院青年基金项目;河南省高等学校重点科研项目;新乡市科技局科技攻关计划项目

在线出版日期：2023-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：52-60