环状RNA hsa_BABAM1_1在子痫前期胎盘滋养细胞增殖和凋亡中的作用

摘要：

目的 探讨环状RNA(circRNA)hsa_BABAM1_1在子痫前期胎盘组织中的表达及对人胎盘滋养细胞株(HTR-8/SVneo)增殖、凋亡的作用.方法 收集宁夏医科大学总医院妇产科2020年1-12月收治的正常产妇22例和子痫前期产妇22例的胎盘组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组胎盘中circRNA hsa_BABAM1_1的表达.在缺氧条件下培养HTR-8/SVneo 细胞,建立子痫前期细胞模型.采用qRT-PCR法检测常氧和缺氧条件下细胞中circRNA hsa_BABAM1_1的表达.采用RNase R酶消化实验和放线菌素D处理实验验证circRNA hsa_BABAM1_1的稳定性.采用荧光原位杂交(FISH)及核质分离法观察circRNA hsa_BABAM1_1在HTR-8/SVneo细胞中的定位.构建高表达circRNA hsa_BABAM1_1慢病毒和对照空载体慢病毒稳转株,给予细胞以下不同处理:对照、空载体、过表达circRNA hsa_BABAM1_1、缺氧、空载体+缺氧及过表达circRNA hsa_BABAM1_1+缺氧.采用细胞计数试剂(CCK-8)及5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验评估细胞增殖能力的变化,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用Western-blot法测定细胞凋亡相关蛋白的变化,qRT-PCR法检测miR-130b-5p在HTR-8/SVneo细胞和胎盘中的表达.采用Pearson相关分析circRNA hsa_BABAM1_1与miR-130b-5p的相关性.结果 子痫前期胎盘和缺氧诱导的HTR-8/SVneo 细胞中circRNA hsa_BABAM1_1表达水平低于对照(均P＜0.05).在HTR-8/SVneo细胞中,circRNA hsa_BABAM1_1主要定位和表达于细胞质中.与对照相比,缺氧细胞存活率[(61.17±1.50)％比(100.00±3.10)％,q=12.95,P＜0.01]、EdU阳性细胞比例[(25.33±0.88)％比(37.33±0.89)％,q=9.62,P＜0.01]下降,凋亡率[(11.01±0.29)％比(4.33±0.31)％,q=23.89,P＜0.01]增加,凋亡相关蛋白激活态半胱天冬酶 9(cleaved caspase-9)、cleaved caspase-3、cleaved caspase-7和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)表达水平升高,Bcl-2表达水平下降,miR-130b-5p的表达水平升高(均P＜0.05).与缺氧+空载体组相比,缺氧+过表达circRNA hsa_BABAM1_1组缺氧诱导的HTR-8/SVneo 细胞存活率[(89.21±2.79)％比(61.23±2.13)％,q=9.71,P＜0.01]、EdU 阳性细胞比例[(36.67±0.88)％比(24.33±1.86)％,q=9.89,P＜0.01]增加,凋亡率[(6.86±0.26)％比(11.74±0.12)％,q=17.67,P＜0.01]下降,凋亡相关蛋白 cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、cleaved caspase-7 和 Bax 表达水平下降,Bcl-2 表达水平升高,miR-130b-5p的表达水平下降(均P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,circRNA hsa_BABAM1_1和miR-130b-5p在胎盘组织中的表达呈负相关(r=-0.44,P＜0.01).结论 circRNA hsa_BABAM1_1在子痫前期胎盘及缺氧诱导的HTR-8/SVneo细胞中低表达,主要定位和表达于胞质中,并具有高度稳定性.上调circRNA hsa_BABAM1_1的表达可促进缺氧诱导的HTR-8/SVneo 细胞增殖、抑制其凋亡,其作用机制可能与调控miR-130b-5p的表达有关.

关键词：环状RNAhsa_BABAM1_1、子痫前期、滋养细胞、增殖、凋亡

所属期刊栏目：31

分类号：R735.2;R363.1;R5

资助基金：国家自然科学基金;宁夏回族自治区重点研发计划重点项目;宁夏回族自治区重点研发计划重点项目;宁夏自然科学基金重点项目;宁夏自然科学基金一般项目

在线出版日期：2023-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：34-44