钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎海马神经干细胞凋亡
目的 探讨钙拮抗剂对铁诱导的原代神经干细胞损伤是否具有保护作用.方法 以大鼠胚胎(E17.5)海马神经干细胞(hNSC)为细胞模型.首先鉴定hNSC的神经干细胞特征,确认其表达L型钙通道Cav1.2基因mRNA及相关蛋白;然后分别给予细胞如下处理:①对照;②加铁(0.9 mmol/L铁剂);③加钙拮抗剂(氟桂利嗪0.1 μmol/L或尼莫地平10 nmol/L);④钙拮抗剂+铁,观察钙拮抗剂对铁诱导的hNSC细胞活性及凋亡的影响;最后观察铁超负荷对细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对铁诱导细胞活性的影响.免疫组化法鉴定细胞神经干细胞特征;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Cav1.2基因mRNA表达,免疫组化法及流式细胞仪法检测蛋白表达;XTT比色法检测细胞活性;Annexin V/碘化丙啶(PI)流式细胞仪检测细胞凋亡;抗磷酸化-ERK1/2流式细胞仪检测ERK磷酸化水平.结果 hNSC呈现典型神经干细胞特征,表达Cav1.2基因mRNA(158 bp)及相关蛋白;钙拮抗剂可以显著增加临床相关浓度(0.9 mmol/L)铁超负荷诱导的hNSC的细胞活性(尼莫地平,P＜0.01),以及减少细胞凋亡;临床相关浓度铁超负荷可以诱导hNSC ERK磷酸化,MEK抑制剂U0126可显著增加铁损伤hNSC的细胞活性(P＜0.01).结论 钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎hNSC凋亡,可能通过抑制ERK磷酸化过程.
铁超负荷、神经干细胞、钙拮抗剂、神经退行性障碍、出血性脑卒中、细胞外信号调节激酶
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R735.7;R575.5;R81
香港大学CRCG-HKU研究基金CRCG-HKU;10207982-08296-21100-323
2016-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
850-856
