大鼠脑卒中相关基因的抑制性差减杂交文库构建

摘要：

目的 建立寒冷加高盐刺激大鼠脑卒中的大脑组织差异cDNA文库。
方法 正常Wistar大鼠随机分为寒冷加高盐刺激的实验组和不予任何处理的对照组。取实验组发生脑卒中和对照组的大脑组织。提取两组组织的mRNA，按照抑制性差减杂交试剂盒说明进行实验。在三个水平设定了检验差减效率的实验。首先是使用试剂盒提供的骨骼肌mRNA加入外源性PhiX174（HaeⅢ）作为阳性实验组与我们的实验样品进行平行差减，用来 证明系统正常。其次是采用PCR扩增看家基因GPDH的方法观察本次实验的差减效果。最后在两库随机各挑取288个克隆测序，比较相同序列的重复情况。
结果 差减各过程符合理论质量要求，分别得到一个脑卒中特异表达基因的片段库和一个正常特异表达基因片段库。卒中库的理论容量是7.1×104，正常库的理论容量是5.5×105。差减效率分析表明 结果良好。
结论 成功地建立了一个脑卒中特异表达基因的片段库和一个正常特异表达基 因片段库。为进一步深入研究该大鼠脑卒中模型的基因奠定了基础。

关键词：大鼠、脑卒中、大脑、寒冷、高盐、cDNA、抑制性差减杂交

所属期刊栏目：9

分类号：R544.1;Q513;Q753(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：教育部高校骨干教师资助计划

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：53-57