10.3969/j.issn.1673-7245.2001.01.020
腺病毒介导血管平滑肌细胞转染表达血管紧张素Ⅱ2型受体的研究
目的 体外培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)并以腺病毒介导转染表达血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)2型受体(AT2R)。
方法 取大鼠主动脉血管,以常规组织块贴壁法培养VSMC;用同源重组方法构建带AT2R基因的复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV-AT2R),并加以鉴定、扩增,以制取高滴度AdCMV-AT2R转染液,体外转染VSMC;用RT-PCR方法检测AT2R mRNA表达,免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法检测AT2R蛋白表达,流式细胞仪检测AT2R表达率,同时检测AT1R的表达变化。
结果 构建的AdCMV-AT2R体外转染培养VSMC表达率为89.51%。以免疫组化、免疫印迹和RT-PCR检测AT2R表明,转染后AT2R表达明显增强,并随表达时间延长而增加,48小时达峰值。AT2R转染表达不影响AT1R表达。
结论 腺病毒载体可较高效率介导AT2R在体外培养的VSMC转染表达,AT1R表达不受其影响。转染表达AT2R的VSMC可作为研究AngⅡ对其增殖、迁移以及凋亡等生物学行为影响的良好细胞模型。
血管紧张素Ⅱ2型受体 血管平滑肌细胞、腺病毒载体
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R544.1;Q78;Q2-33(心脏、血管(循环系)疾病)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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