敲除ACSL3增加HCC细胞对葡萄糖缺乏敏感性

摘要：

目的:研究长链脂酰辅酶A合成酶3(ACSL3)在代谢应激下对肝细胞癌(HCC)细胞Huh7存活的影响.方法:从TCGA-LICH数据库下载HCC患者RNA表达谱和临床数据,统计ACSL3在HCC患者中的表达情况,绘制Kaplan-Meier生存曲线;在广西医科大学第一附属医院的HCC队列中收集44例原发性HCC患者组织和癌旁组织样本,通过免疫组化检测ACSL3的表达;利用siRNA和CRISPR/CAS 9技术沉默/敲除Huh7细胞中的ACSL3基因,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、克隆形成实验和Transwell侵袭实验检测ACSL3敲除对Huh7细胞增殖和侵袭能力的影响.在完全培养基和葡萄糖缺乏条件下,通过细胞流式术检测对照组细胞和ACSL3沉默/敲除组细胞的死亡,并检测细胞中ATP、β-羟基丁酸的变化.结果:与正常肝组织相比,HCC组织的ACSL3表达较高(P<0.05),且ACSL3高表达患者生存期较短(P<0.05).敲除ACSL3不影响Huh7细胞的增殖能力、克隆形成能力以及侵袭能力(P>0.05).在葡萄糖缺乏下,ACSL3沉默/敲除导致Huh7细胞的存活率显著下降(P<0.05),ATP产生水平下降以及β-羟基丁酸生成受抑制(P<0.05).结论:通过抑制β氧化,敲除ACSL3促进了HCC细胞死于葡萄糖缺乏.

关键词：ACSL3、葡萄糖缺乏、Huh7、肝癌

所属期刊栏目：40

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：国家自然科学基金No.81972291

在线出版日期：2023-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：603-610