27nt-miRNA对过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响及分子机制

摘要：

目的:探讨27nt-miRNA对经过氧化氢(H2O2)处理的血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡、活力和迁移的影响及作用机制.方法:将大鼠主动脉VSMCs分为5组:空白对照组、H2O2组、anti-27nt-miRNA+H2O2组、阴性对照+H2O2组和27nt-miRNA+H2O2组.空白对照组:不做任何处理;H2O2组:用500 μmol/LH2O2处理6 h诱导细胞凋亡;anti-27nt-miRNA+H2O2组:转染27nt-miR-NA反义序列慢病毒载体后,用500 μmol/L H2O2处理6 h诱导细胞凋亡;阴性对照+H2O2组:转染随机阴性序列慢病毒载体后,用500 μmol/LH2O2处理6 h诱导细胞凋亡;27nt-miRNA+H2O2组:转染27nt-miRNA高表达慢病毒载体后,再用500 μmol/L H2O2处理6 h诱导凋亡.使用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞术检测VSMCs存活率、凋亡率,划痕实验检测细胞迁移率,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Bcl-2、Bax蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,H2O2组细胞活力和迁移率降低(P＜0.05)、细胞凋亡率上升(P＜0.05),提示成功构建VSMCs凋亡模型.对比阴性对照+H2O2组,27nt-miRNA+H2O2组可抑制细胞的活力和迁移能力(P＜0.05),且细胞凋亡率上升(P＜0.05),凋亡相关蛋白Bax表达水平上升,Bcl-2表达水平下降(P＜0.05),而anti-27nt-miRNA+H2O2组细胞凋亡率降低、细胞活力和迁移率增加,Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论:过表达27nt-miRNA可促进H2O2所诱导的VSMCs凋亡和抑制其活力和迁移能力,其机制可能与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达改变密切相关.

关键词：27nt-miRNA、血管平滑肌细胞、凋亡、过氧化氢

所属期刊栏目：39

分类号：R54;R966(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金;南宁市良庆区科学研究与技术开发计划项目;广西中医药适宜技术开发与推广项目

在线出版日期：2022-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：781-786