10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.010
秦皮苷对脂多糖诱导的巨噬细胞极化的影响
目的:初步探讨秦皮苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞向M1、M2型极化的影响.方法:体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞系,将细胞随机分为对照组、LPS处理组(模型组)以及LPS+秦皮苷组(实验组).培养细胞24h后,利用细胞活力检测试剂盒(CCK-8试剂)和活/死细胞(Calcein-AM/PI)双染试剂盒检测秦皮苷对细胞增殖的影响;通过1.1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)法测定秦皮苷的总抗氧化活性,二氯二氢荧光素二氢乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测各组细胞内活性氧(ROS)的表达水平;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测巨噬细胞相关基因的表达;免疫荧光染色观察巨噬细胞细胞内相关生物标志物[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和CD206)]的表达水平.结果:秦皮苷浓度为20μg/mL时,能够明显促进巨噬细胞的增殖,巨噬细胞活力最好.DPPH和DCFH-DA荧光探针检测结果均显示秦皮苷具有良好总抗氧化能力,能够清除细胞内的ROS.与对照组相比,模型组中炎症相关基因白介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD86和iNOS的表达上升,抗炎相关基因精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206和白介素-10(IL-10)的表达上升(P<0.05).通过秦皮苷处理后,与模型组相比,实验组中炎症相关基因表达下降,抗炎相关基因表达上升(P<0.05);同时,实验组中M1巨噬细胞相关蛋白(iNOS)分泌受到抑制(P<0.001),M2型巨噬细胞相关蛋白(CD206)表达升高(P<0.001).结论:秦皮苷可以抑制LPS诱导的M1型巨噬细胞极化,促进巨噬细胞从M1表型向M2表型极化,对M1/M2亚型失衡具有调节作用,有利于维持其动态平衡,有望为炎症的临床治疗提供新的方式.
秦皮苷、氧化应激、巨噬细胞极化、炎症
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R963(药理学)
国家自然科学基金;广西科技重大专项项目;广西医科大学大学生创新创业训练计划资助项目
2022-06-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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569-576