10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.04.005
TERT沉默对OGD/R诱导的大鼠体外星形胶质细胞损伤的影响及机制
目的:探讨端粒酶逆转录酶(TERT)沉默对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的大鼠体外星形胶质细胞损伤的影响及机制.方法:体外原代培养新生大鼠脑皮层星形胶质细胞,建立星形胶质细胞OGD/R损伤模型.将细胞分为正常对照(Control)组、糖氧剥夺6 h/复糖复氧24 h(OGD/R)组、OGD/R+转染阴性对照(OGD/R+Si-Con)组及OGD/R+干扰TERT表达的SiRNA(OGD/R+Si-TERT)组.免疫荧光检测TERT及GFAP在星形胶质细胞的定位及表达变化.TERT-SiRNA转染后48 h收集细胞,通过Western blotting检测TERT的表达以验证转染效率.采用CCK-8法检测各组细胞的活力,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡情况,Western blotting检测p53、Bax和Bcl-2蛋白的表达水平.结果:免疫荧光结果显示,TERT可表达于星形胶质细胞,以胞核为主,胞质表达较少.与OGD/R+Si-Con组比较,转染TERT-siRNA的星形胶质细胞中TERT表达降低(P<0.05),表明TERT-SiRNA转染星形胶质细胞成功;与Control组比较,OGD/R组、OGD/R+Si-Con组及OGD/R+Si-TERT组细胞活力及Bcl-2蛋白表达均降低,细胞凋亡率及TERT、P53和Bax蛋白表达均升高(均P<0.05);与OGD/R+Si-Con组比较,OGD/R+Si-TERT 组细胞凋亡率及 P53、Bax 蛋白表达升高,细胞活力及 TERT、Bcl-2 蛋白表达降低(均 P<0.05).结论:TERT基因沉默促进OGD/R诱导的大鼠星形胶质细胞凋亡,其机制可能与激活P53/Bcl-2/Bax信号通路有关.
TERT、星形胶质细胞、OGD/R、凋亡
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R743.3(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金;广西自然科学基金资助项目
2022-06-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
540-546