miR-106a-5p通过调控TLR4表达对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的:探讨miR-106a-5p通过调控TLR4对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响.方法:体外培养RA滑膜成纤维细胞MH7A,将细胞分为8组:miR-NC组(转染miR-NC)、miR-106a-5p组(转染miR-106a-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-TLR4组(转染si-TLR4)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-106a-5p组(转染anti-miR-106a-5p)、miR-106a-5p+pcDNA组(共转染miR-106a-5p和pcDNA)以及miR-106a-5p+TLR4组(共转染miR-106a-5p和TLR4).采用qRT-PCR检测RA患者滑膜中miR-106a-5p和TLR4 mRNA的表达;MTT检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blotting检测TLR4、PCNA、Bax和Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶实验验证miR-106a-5p和TLR4关系.结果:与对照组相比,RA滑膜组织中miR-106a-5p表达明显降低(P<0.05),TLR4 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05).与miR-NC组相比,miR-106a-5p组的miR-106a-5p表达、细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显增加(P<0.05);48 h及72 h的细胞OD值、PCNA和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05).与si-NC组相比,si-TLR4组的TLR4 mRNA及蛋白表达、48 h及72 h的细胞OD值、PCNA和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05);细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显增加(P<0.05).与miR-NC组相比,miR-106a-5p组的TLR4-WT荧光素酶活性明显降低(P<0.05),而TLR4-MUT荧光素酶素酶活性无明显变化.与anti-miR-NC组相比,anti-miR-106a-5p组中miR-106a-5p表达明显降低(P<0.05),TLR4蛋白表达明显增加(P<0.05).与miR-106a-5p+pcDNA组相比,miR-106a-5p+TLR4组的TLR4 mRNA及蛋白表达、48 h及72 h的细胞OD值、PCNA和Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05);细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显降低(P<0.05).结论:miR-106a-5p通过下调TLR4抑制滑膜成纤维细胞MH7A的增殖,并诱导其细胞凋亡.

关键词：miR-106a-5p;TLR4;类风湿关节炎;滑膜成纤维细胞;增殖;凋亡

所属期刊栏目：38

分类号：R593.22(全身性疾病)

资助基金：三亚市医疗卫生科技创新项目No.2015YQW09

在线出版日期：2021-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1942-1948