miR-508-3p靶向AFF4/TGFβ1信号通路调控人牙髓细胞分化的机制研究

摘要：

目的:探讨miR-508-3p对缺氧牙髓细胞分化的影响及其机制.方法:用氯化钴(CoC12)诱导缺氧模型,记为实验组.用等量生理盐水处理的牙髓细胞为对照组.脂质体法将miR-NC、miR-508-3p、si-NC、si-AFF4、miR-508-3p+pcDNA、miR-508-3p+pcDNA-AFF4转染缺氧牙髓细胞.RT-qPCR法检测miR-508-3p、AFF4的表达及分化相关基因牙本质基质蛋白(DMPl)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)的表达.Westem blotting法检测细胞中AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad、骨形态发生蛋白(BMP)的表达.双荧光素酶报告实验检测miR-508-3p与AFF4的靶向关系.结果:与对照组相比,实验组牙髓细胞miR-508-3p表达显著升高,AFF4、DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达均显著降低(均P＜0.01).过表达miR-508-3p可显著抑制DMP1、DSPP、OCN、ALP的表达,敲减AFF4具有相似的作用(均P＜0.01).双荧光素酶报告实验显示,miR-508-3p与AFF4存在互补的结合位点,且过表达AFF4逆转了过表达miR-508-3p对缺氧牙髓细胞的分化抑制作用(P＜0.01).上调miR-508-3p表达或下调AFF4表达能显著降低TGFβ1、Smad、BMP蛋白表达(P＜0.01).结论:miR-508-3p通过靶向AFF4抑制下游TGFβ1信号通路的活性发挥抑制缺氧牙髓细胞分化作用.

关键词：牙髓细胞;成牙分化;miR-508-3p;AFF4.TGFβ1信号通路

所属期刊栏目：38

分类号：R78(口腔科学)

资助基金：四川省卫生和计划生育科研课题资助项目No.18PJ024

在线出版日期：2021-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1671-1677