10.16190/j.cnki.45-1211/r.2021.07.002
舒尼替尼通过调控lncRNA ROR/miR-670-3p/MARCH5轴对胃癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:探讨舒尼替尼对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及可能的调控机制.方法:体外培养胃癌细胞GC9811-P,分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、si-ROR组、si-NC组、miR-670-3p组、miR-NC组、si-MARCH5组、舒尼替尼+pcDNA-MARCH5组和舒尼替尼+pcDNA-NC组.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中lncRNA ROR、miR-670-3p和泛素E3连接酶膜相关锌指蛋白5(MARCH5)的mRNA表达;蛋白印迹(Western Blotting)法检测细胞中MARCH5蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA ROR与miR-670-3p及miR-670-3p与MARCH5的靶向关系.结果:与对照组比较,低剂量组、中剂量组和高剂量组GC9811-P细胞活力及细胞中Cy-clinD 1蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),lncRNA ROR、MARCH5的mRNA和蛋白降低(P<0.05),miR-670-3p表达升高(P<0.05).与si-NC组比较,si-ROR组和si-MARCH5组GC9811-P细胞活力和Cy-clinDl蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-670-3p组GC9811-P细胞活力和CyclinD 1蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).lncRNA ROR在GC9811-P细胞中靶向负调控miR-670-3p表达,miR-670-3p靶向负调控MARCH5表达.与舒尼替尼+pcDNA-NC组比较,舒尼替尼+pcDNA-MARCH5组GC9811-P细胞活力和CyclinD 1蛋白表达均升高(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05).结论:舒尼替尼可能通过调控lncRNAROR/miR-670-3p/MARCH5轴抑制了胃癌细胞增殖并诱导其凋亡.
胃癌;舒尼替尼;lncRNA ROR;miR-670-3p;MARCH5;细胞增殖;凋亡
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R735.2(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目No.81372323
2021-08-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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