10.16190/j.cnki.45-1211/r.2019.05.010
慢病毒介导miR-499a-3p抑制序列在人脐静脉内皮细胞中的表达及对细胞增殖的影响
目的:研究miR-499a-3p低表达对人脐静脉内皮细胞(HUEVC)增殖的影响.方法:利用RNA干扰技术构建携带has-miR-499a-3p抑制序列的慢病毒载体,在293T细胞中包装并测滴度.用敲低miR-499a-3p的病毒(下调组)及空载病毒(空载组)分别转染HUEVC,未转染的HUEVC为空白对照组.用RT-PCR法检测各组HUEVC中miR-499a-3p及其下游靶基因ADAM10的表达,CCK-8法检测HUEVC的增殖能力.结果:慢病毒载体构建成功,下调组病毒滴度为1×109 TU/mL.与空白对照组相比,下调组miR 499a-3p表达水平明显降低,ADAM10表达水平明显升高,HUEVC的增殖能力明显提高,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:慢病毒介导miR 499a-3p表达抑制的HUEVC稳转细胞株构建成功,miR-499a-3p表达下调可促进HUEVC的增殖.
miR-499a-3p、ADAM10、慢病毒载体、人脐静脉内皮细胞
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R543(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金资助项目81660069;广西科学研究与技术开发计划课题资助项目桂科攻1598011-2;广西壮族自治区中青年教师基础能力提升课题资助项目2017KY0113;广西医疗卫生适宜技术研究与开发课题资助项目S201517
2019-07-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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