siRNA干扰肝癌相关抗原Cdc25C表达对Hepa1-6肝癌细胞增殖和迁移的影响及机制研究

摘要：

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制肝癌相关抗原细胞分裂周期蛋白25(Cdc25C)表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和迁移的作用及其机制.方法:将细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染阴性siRNA)及3个实验组(转染siRNA-Cdc25C-1组、转染siRNA-Cdc25C-2组、转染siRNA-Cdc25C-3组).转染8h后,通过荧光显微镜观察转染效率,并采用Western blotting法检测各组Cdc25C蛋白的表达,筛选出最有效的siRNA序列;用荧光定量PCR(qPCR)法检测内质网应激反应(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X-盒结合蛋白(XBP-1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达,CCK-8法和Transwell实验检测Hepa1-6细胞增殖和迁移能力.结果:成功构建Cdc25C低表达的Hepa1-6细胞株,转染siRNA-Cdc25C-1组的转染效率最高且Cdc25C蛋白表达水平最低.与阴性对照组比较,转染siRNA-Cdc25C-1组Hepa1-6细胞的迁移率明显降低,细胞增殖抑制率及GRP78、XBP-1、CHOP基因相对表达量明显升高(P＜0.05).空白对照组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论:Cdc25C基因低表达能抑制肝癌细胞增殖和迁移,其机制可能与ERS有关.

关键词：Hepa1-6肝癌细胞、Cdc25C、小RNA干扰、内质网应激反应

所属期刊栏目：36

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81160264;广西自然科学基金资助项目2016GXNSFAA380267,2018GXNSFAA281071

在线出版日期：2019-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：701-706