全骨髓贴壁法与密度梯度离心法培养小鼠内皮祖细胞的方法比较

摘要：

目的:比较全骨髓贴壁法与密度梯度离心法分离培养小鼠内皮祖细胞(EPCs)的差异.方法:取8周龄雄性近交系昆明小鼠,提取原代EPCs,分别采用全骨髓贴壁法和密度梯度离心法分离培养细胞,观察细胞形态、细胞摄取DiI-acLDL、结合FITC-UEA-I双阳性率及细胞生长增殖情况.结果:全骨髓贴壁法培养第4天,可见较多贴壁细胞,呈圆形、短梭形,部分为长梭形;第6～8天贴壁细胞多为梭形及类圆形;随着培养时间的延长,梭形细胞数量渐渐增多,可出现细胞集落,10d后EPCs大量增殖,14d细胞长满培养瓶底部.密度梯度离心法接种24 h后可见圆形贴壁细胞,并逐渐增多变形;培养至第4～7天,可以观察到贴壁细胞明显增多且体积变大,细胞为类圆形、梭形或多边形,第7～9天,细胞呈集落生长,多数细胞呈多边形或长梭型;培养至第2周可见贴壁细胞生长呈“铺路石”样外观.全骨髓贴壁法细胞摄取DiI-acLDL和结合FITC-UEA-I双阳性率高于密度梯度离心法(P＜0.05),但两种方法细胞增殖率比较无明显差异(P＞0.05).结论:全骨髓贴壁法与密度梯度离心法均可培养出EPCs,且两种方法培养的细胞增殖活性相当,但前者更简单易行,EPCs培养成功率更高.

关键词：小鼠、内皮祖细胞、细胞培养、全骨髓贴壁法、密度梯度离心法

所属期刊栏目：35

分类号：R329(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81660147

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：286-289