重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白转染对兔脂肪干细胞生长增殖及成脂分化的影响

摘要：

目的:探讨携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad-GFP)转染兔脂肪干细胞(rADSCs)后对其生长增殖及成脂分化的影响.方法:取新西兰大白兔(1.5～2.0 kg、8～12周龄)腹股沟皮下脂肪垫3 mL,采用贴壁法体外分离培养rADSCs.取第3代rADSCs细胞分为Ad-GFP转染组(A组)和未转染的对照组(B组),流式细胞术检测Ad-GFP转染rADSCs的效率.比色法检测两组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,四氮唑复合物(XTT)比色法检测rADSCs的增殖情况.细胞成脂分化14 d后行油红O染色,检测脂肪细胞分化率及细胞内脂滴含量.结果:两组rADSCs表面标志物CD29、CD44、CD90、CD105阳性表达率均在95％以上.不同MOI值rADSCs转染效率不同,当MOI值为10、30、50、100时转染效率分别为11.2％、42.7％、95.3％、97.1％.Ad-GFP转染后的rASCs贴壁后呈梭形,细胞质丰富,保持了良好的正常形态.两组rASCs培养上清液中LDH含量及rADSCs增殖情况比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).两组细胞分化率和细胞内脂滴含量比较,差异均无统计学意义(均P ＞0.05).结论:Ad-GFP转染rADSCs后,GFP可在细胞内稳定表达,对细胞无明显毒性作用,不影响rAD-SCs的生长、增殖及成脂化能力,是一种理想的脂肪干细胞示踪标记方法.

关键词：脂肪干细胞、重组腺病毒绿色荧光蛋白、细胞标记、细胞增殖、细胞分化

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分类号：R394.2

资助基金：国家自然科学基金资助项目81560316,81560358;广西科学研究与技术开发计划资助项目桂科攻1598012-1;南宁市科学研究与技术开发计划资助项目20153089,zc20153002

在线出版日期：2017-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：938-942