原代大鼠胰岛细胞分离纯化及单细胞培养初探

摘要：

目的:探讨获得高质量、数量多的原代大鼠胰岛细胞的有效可靠的方法.方法:以V型胶原酶顺行灌注大鼠胆总管消化胰腺,以Histopaque 1077等密度区带离心法分离胰岛和胰腺腺泡组织.以双硫腙染色及免疫组化法分别鉴定提取物,胰岛素释放试验鉴定胰岛的活性.结果:经Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化,每只大鼠平均获取(251±26)枚胰岛.双硫腙染色后完整胰岛呈猩红色细胞团.胰岛单细胞培养及胰岛素释放试验起始2.8 mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为(23.53±5.946) pmol/L,16.7 mmol/L高糖刺激后胰岛素分泌量为(32.61±4.085) pmol/L,最后恢复2.8 mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为(27.81±3.616)pmol/L,3者之间比较差异均有统计学意义(P＜0.05),提示胰岛细胞活性良好.结论:用Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化原代大鼠胰岛细胞兼具有数量多、活性好、纯度高的优点,可继续用于研究.

关键词：分离纯化、胰岛细胞、等密度区带离心

所属期刊栏目：33

分类号：R-332(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31160189

在线出版日期：2016-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：208-211