内含子源性27nt-miRNA对内皮型一氧化氮合酶表达调节及血管内皮细胞管腔形成的影响
目的:探讨内含子源性27nt-miRNA对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达调节的分子机制及其对血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力的影响.方法:构建wt-27nt-miRNA、mut-27nt-miRNA和空白对照序列的高表达质粒,分别转染人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),采用RT-PCR、Western blotting检测eNOS mRNA和蛋白表达水平;MTT检测HUVECs增殖能力,划痕和Transwell实验检测HUVECs的迁移能力,Matrigel检测HUVECs的管腔形成能力.结果:(1)与空白质粒对照组比较,wt-27nt-miRNA表达组HUVECs eNOS mRNA降低39.51％(0.49±0.02 vs 0.81±0.02,P＜0.05),其蛋白质表达量下降47.41％(0.71±0.07 vs1.35±0.06,P＜0.05).(2)与空白质粒对照组相比,wt-27nt-miRNA表达组HUVECs增殖明显减少,抑制率为41.86％;wt-27nt-miRNA表达组HUVECs迁移速度明显减缓,且迁移数目降低75.55％(28.75士1.71 vs117.60±4.45,P＜0.01),未能形成明显管腔样结构.在mut-27nt-miRNA表达组中,上述指标比空白质粒对照组降低(P＜0.05),但比wt-27nt-miRNA表达组显著升高(P＜0.05),特别是管腔形成数量及管腔长度与空白质粒对照组相近.结论:内含子源性27nt-miRNA显著抑制HUVECs的增殖、迁移和管腔形成的能力,并与内含子源性27nt-miRNA对eNOS表达的调控相关.
内含子源性27nt-miRNA、管腔形成、内皮型一氧化氮合酶
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R-33(医学研究方法)
国家自然科学基金资助项目81373403;广西研究生科研创新课题资助项目YCSZ2015119
2016-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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