慢病毒介导基因转染人韧带成纤维细胞表达的研究

摘要：

目的：：探讨慢病毒介导的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转染人韧带成纤维细胞的转染效率,以及转染GFP后是否对韧带成纤维细胞的生物活性产生影响,为下一步实验提供理论依据。方法：采用组织块贴壁法培养原代人韧带成纤维细胞,取P2代细胞进行慢病毒感染,96 h后荧光显微镜观察转染效率,流式细胞凋亡检测法(FACS)及细胞增殖及毒性检测法(MTT)检测其转染前后的生物学活性变化。结果：成功建立人韧带成纤维细胞培养模型,荧光显微镜 GFP阳性细胞率为95%；FACS检测结果显示未转染组与稳定转染组细胞凋亡率分别为(1.91±0.13)%和(1.96±0.12)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)；MTT结果显示转染前后细胞生物学活性无显著影响(P>0.05)。结论：慢病毒介导的 GFP 基因能高效稳定转染人韧带成纤维细胞,同时并不影响其生物学活性,能满足后续实验的需要。

关键词：慢病毒载体、人韧带成纤维细胞、绿色荧光蛋白

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金地区科学基金项目81160217

在线出版日期：2015-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：5-7