目的基因CXCL-1慢病毒表达系统的构建及在人正常肝细胞中的功能研究
目的:探讨含目的基因趋化因子生长调节基因1(CXCL-1)慢病毒表达系统的构建及CXCL-1对7702正常肝细胞生长、增殖、迁移生物学功能的影响.方法:构建含目的基因CXCL-1的慢病毒表达系统,建立携带GFP荧光标记并过度表达CXCL-1的7702正常肝细胞系,Western blot方法检测CXCL-1在转染细胞中的表达,细胞单克隆形成实验,MTT实验,Transwell实验检测7702细胞表达CXCL-1后生长、增殖和迁移能力的变化情况.结果:①成功构建目的基因CXCL-1慢病毒表达系统,病毒滴度检测结果为2.00E+8TU/mL;②转染48 h后经流式细胞仪检测,转染率达94.5%;③CXCL-1/7702组克隆形成率显著高于其余两对照组(P<0.05);④MTT比色法结果显示:CXCL-1/7702组分别与空载GFP/7702组及空白对照7702组相比较,生长速度明显较快(P<0.05);⑤Transwell实验显示:CXCL-1/7702组、GFP/7702组、7702组肝细胞系均无迁移能力.结论:成功构建含目的基因CXCL-1的慢病毒表达系统,CXCL-1对正常肝细胞具有明显的促细胞生长与增殖功能,但无促进正常肝细胞迁移的功能.
细胞趋化因子、趋化因子生长调节基因1、正常肝细胞、生长和迁移
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R-33(医学研究方法)
广西自然科学基金资助项目2012jjAA40482
2014-12-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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