WWOX基因慢病毒载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达

摘要：

目的:构建及鉴定WWOX基因慢病毒载体,观察WWOX基因在人卵巢癌PEO1细胞株中的表达,为进一步研究WWOX基因的作用机制及其功能奠定基础.方法:采用PCR技术从克隆质粒模板中获得全长WWOX基因,将WWOX基因 亚克隆到慢病毒载体PCDH-CMV-MCS-EFl-copGFP中,构建慢病毒载体表达质粒PCDH-WWOX,通过双酶切验证后,慢病毒表达质粒与慢病毒包装质粒pPACKHl-GAG,pPACKH1-REV,Pvsv-G共转染293T细胞,获得携带WWOX基因及EGFP基因的重组慢病毒Lenti WWOX,并转染靶细胞人卵巢癌PEO1细胞株.通过RT-PCR和Western Blot验证Lenti WWOX在PEO1细胞株中的表达.结果:测序结果显示成功构建重组慢病毒载体表达质粒PCDH-WWOX;表达质粒与辅助包装质粒共转染包装细胞293T后能产生慢病毒颗粒并能有效感染靶细胞PEO1,转导效率约为60%,有WWOX基因mRNA和蛋白水平的高表达.结论:本实验成功构建了携带WWOX基因慢病毒表达载体,包装成病毒后能有效感染卵巢癌PEO1细胞.

关键词：WWOX、慢病毒载体、卵巢癌

所属期刊栏目：28

分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：本课题受国家自然科学基金资助30860303;广西医疗卫生重点科研课题重200871

在线出版日期：2011-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：338-341