广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子基因在NIH3T3细胞中的表达

摘要：

目的:构建广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子(NGF)基因的真核表达载体pcDNA3.1(一)-NGF,并在NIH3T3细胞中进行表达.方法:采用RT-PCR的方法扩增蛇毒NGF的基因片段,将目的基因、真核表达载体pcDNA3.1(一)分别酶切后回收,连接,转化而构建重组表达载体pcDNA3.1(一)-NGF,经酶切和测序对重组体进行鉴定.利用脂质体LipofectamineTM2000方法转染NIH3T3细胞,对阳性克隆裂解上清中NGF的表达用SDS-PAGE、Western-blot的方法检测.结果:重组载体经酶切、测序分析,插入的基因片段为表达蛇毒NGF的基因,NGF基因在NIH3T3细胞中获得表达.结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(一)-NGF,并检测出在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步开展NGF基因治疗神经系统的疾病奠定了实验基础.

关键词：蛇毒、神经生长因子、基因克隆、真核表达载体、NIH3T3细胞系

所属期刊栏目：27

分类号：R33(人体生理学)

资助基金：广西科技厅资助项目桂科自98110396,桂科能0630006-5E4Z

在线出版日期：2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：846-849