TUNEL检测心肌细胞凋亡的影响因素探讨

摘要：

目的:探讨避免TUNEL法检测心肌细胞凋亡出现的假阳性和消除非特异性反应的方法以及选择合适的蛋白酶K浓度.方法:4%多聚甲醛固定心肌组织,制作石蜡切片.①将试剂盒说明常规步骤加以改良,将0.3%H2O2放在反应液标记DNA片段之后,先后用小牛血清或羊血清两次封闭非特异性反应;②按蛋白酶K不同剂量分为10、20 μg/mL蛋白酶K和不加蛋白酶K组(均n＝5),再按照改良的TUNEL法检测心肌细胞凋亡.结果:①改良TUNEL法,避免了假阳性,背景清晰;②未加蛋白酶K组较10或20 μg/mL蛋白酶K组心肌细胞凋亡率显著减少(均P<0.05),两组蛋白酶K组心肌细胞凋亡率差异未见有统计学意义(P＞0.05).结论:①改良后的TUNEL方法适用于心肌细胞凋亡的检测;②TUNEL法检测心肌细胞凋亡选择10、20 μg/mL蛋白酶K是适当的.

关键词：凋亡、心肌细胞、原位缺口末端标记法

所属期刊栏目：26

分类号：R392;R322.1+1

资助基金：国家自然科学基金资助项目C030313;广西研究生教育创新计划资助项目2006105981002M08

在线出版日期：2009-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：24-26