双向电泳分离技术的比较和优化

摘要：

目的:比较优化人血清蛋白双向电泳(2-DE)分离技术,提高2-DE对血清蛋白的分辨能力.方法:收集健康人群标本,分别进行多次双向电泳,比较高丰度蛋白的去除前后及传统的考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色两种不同的染色方法等因素对双向电泳图谱质量的影响.结果:考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色相比,血清2-DE图谱检测到平均蛋白质点数分别是(324±25)(n=3)和(785±30)(n=3);去除高丰度蛋白前后比较,未做处理的血清、去除蛋白和IgG血清的2-DE图谱检测到平均蛋白点数分别是(501±25)(n=3)和(813±22)(n=3).结论:去除高丰度蛋白并结合SYPRO-ruby荧光染色可以大大提高血清低丰度蛋白的解析能力.此方法优化了血清蛋白质2-DE技术,为进一步开展疾病血清蛋白质组研究奠定了基础.

关键词：双向电泳、血清蛋白质组、去除高丰度蛋白、染色

所属期刊栏目：26

分类号：R34-33(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：863计划项目2006AA02A308;2008年国家自然科学基金资助课题30760243;广西高校优秀人才资助计划RC2007008;广西自然科学基金资助课题桂科自0640107,桂科自0640092;广西医疗卫生重点课题桂卫重200627

在线出版日期：2009-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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