大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和向软骨细胞表型定向分化的实验研究

摘要：

目的:探讨分离骨髓间充质干细胞(MSCs)并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法,为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据.方法:抽取大鼠四肢骨髓,Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法得到MSCs,在含15%FBS的低糖DMEM培养液中,置于37 ℃,5%CO2培养箱内培养10～14 d.传代后以15%FBS的高糖DMEM培养液(含TGF-β1 10 μg/L,地塞米松10-7 mol/L,维生素C 50 mg/L)对其进行诱导培养.观测在体外培养条件下MSCs的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况.结果:①分离获取了较高纯度的MSCs,保持了细胞的活性;②MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈长梭形;传代培养中形态特性无明显变化,细胞增殖周期缩短,细胞均质性明显提高;③诱导后的细胞由梭形向多角形转变,Ⅱ型胶原免疫组化阳性.结论:①采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的MSCs;②MSCs在体外培养条件下能大量增殖.通过离体培养,可使体内环境下低丰度的MSCs实现数量扩增;③MSCs在特定培养液的诱导下能向软骨细胞表型转化,并能分泌软骨特异性基质,可成为软骨组织工程理想的种子细胞来源.

关键词：间充质干细胞、骨髓、细胞培养、软骨、分化、体外

所属期刊栏目：21

分类号：Q28(细胞生物学)

在线出版日期：2004-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：179-182