10.3969/j.issn.1002-5235.2020.06.001
马立克氏病病毒糖蛋白gC多克隆抗体的制备及反应特异性研究
马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)糖蛋白C(glycoprotein C,gC)是参与MDV水平传播的重要毒力因子,但其具体作用机制尚未明确.研究gC蛋白所需的抗体在国内未见报道,为简化抗体制备程序,本研究采用合成抗原肽免疫的策略,通过生物信息学软件分析发现gC蛋白的优势抗原表位主要集中在其69~85氨基酸区段,据此合成肽段N-NSESTNEH-TITETTGKN-C作为抗原免疫日本大耳白兔.在有弗氏佐剂条件下,5次免疫后采集抗血清,斑点印迹试验显示制备的抗gC多克隆抗体与合成肽的反应效价为1:10000;经亲和层析柱纯化后的gC抗体具有良好的反应特异性,对转染或MDV感染的细胞中运用免疫荧光试验和免疫印迹技术均能检测到特异的阳性信号.与疫苗毒相比,广西野毒分离株gC蛋白的免疫荧光信号更强.本研究获得的MDV的gC多克隆抗体可用于后续对gC蛋白功能的研究.
马立克氏病病毒、糖蛋白gC、合成肽、多克隆抗体
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S858.353(动物医学(兽医学))
广西自然科学基金2016GXNSFCA380004
2020-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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