基于CRISPR/Cas9系统构建Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞系

摘要：

为构建Slfn2-/-小鼠肺癌细胞系(Lewis lung carcinoma,LLC),本文利用CRISPR/Cas9技术,在CHOPCHOP网站筛选Slfn2基因的sgRNA序列,将合成的oligo序列退火后连接至pLenti CRISPR v2质粒中,并与pMD2.G、psPAX2共转染至293T细胞中包装慢病毒;利用包装的慢病毒感染LLC细胞,经筛选和单克隆培养,获取Slfn2--敲除的LLC细胞.结果显示:SgRNA成功插入载体重组质粒;利用3质粒包装的慢病毒成功将LLC中的Slfn2基因突变,获得丢失8个碱基移码突变和丢失180个碱基缺失突变的Slfn2-/-小鼠肺癌细胞.可见,利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞.

关键词：肺癌、慢病毒、Slfn2、CRISPR/Cas9

所属期刊栏目：40

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;广西自然科学基金项目;广西大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2022-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：173-179