Ⅰ群禽腺病毒33K基因的原核表达与鉴定
33K蛋白是Ⅰ群禽腺病毒(fowl adenovirus groupⅠ,FAVⅠ)的非结构蛋白,在感染的过程中起重要作用。为了构建原核表达载体pGEX-33K作为诊断抗原,本研究根据GenBank中FAVⅠ33K基因序列,设计1对特异性引物。用PCR方法扩增目的片段,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组质粒pGEX-33K。将其转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,pGEX-33K表达的分子量为36.7KD,表达产物主要以可溶性的形式存在于菌体中;最佳IPTG诱导浓度为0.75mmol/L,最佳诱导时间为4h;经Western Blot鉴定,pGEX-33K重组蛋白可与FAVⅠ阳性血清发生特异性反应,为FAVⅠ抗体ELISA鉴别诊断试剂盒的研究奠定基础。
Ⅰ群禽腺病毒、33K蛋白、原核表达
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Q78(基因工程(遗传工程))
广西特聘专家专项经费2011B020;新世纪百千万人才工程国家级人选专项经费945200603;广西科技攻关0815009-3-6;广西自然科学基金2010GXNSFA013090
2012-05-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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