不同精子处理对应用ICSI—Tr技术生产转基因水牛胚胎效率的影响
本文主要探讨了不同精子处理对应用显微授精介导（intracytoplasmic sperm injection-mediatedtrans-genesis，ICSI-Tr）生产转基因水牛胚胎效率的影响。本试验以p18T—BCN5．2-IFN-1．1pA—EGFP为载体，比较了精子的不同处理方式（NaOH和冻融）、NaOH处理精子不同时间（5min，10min，20min，30min和60minl以及不同外源DNA浓度（5ng／μL，10ng／μL，25ng／μL和50ng／μL）对ICSI-Tr转基因效率的影响。结果显示：NaOH处理组的囊胚EGFP表达率（46．1％），与冻融精子处理组（47．1％1差异不显著，但发育率显著高于冻融处理精子组（28．3％VS16．7％，P〈0．05）。处理60min组和30min组的分裂率分别为78．9％和77．5％，显著高于20min、10min和5min组的64．0％、60．0％和64．0％（P〈0．05），其中30min处理组的囊胚EGFP表达率高达44．4％，显著高于其它处理组（P〈0．05）。25ng／μL组和50ng／μL组的早期胚胎EGFP表达效率差异不显著（41．3％VS42．5％），但显著高于5ng／肚组和10ng／μL组（22．5％和35．5％），25ng／μL组的囊胚EGFP表达效率显著高于其它组（P〈0．05）。本研究优化了应用ICSI-Tr生产转基因水牛胚胎技术体系，为获得ICSI-Tr转基因水牛奠定了良好的工作基础。
水牛、ICSI—Tr、转基因胚胎
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S814.8(普通畜牧学)
国家转基因重大专项2008ZX08007-003;国家自然基金30960251;广西自然基金0991007Z;南宁市科技攻关201003070G
2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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