鲤鱼cDNA-AFLP技术反应体系的建立

摘要：

将cDNA扩增片段长度多态性（cDNA-amplified fragment length polymorphism）技术应用在鲤鱼基因的转录表达研究中,本文通过对cDNA-AFLP主要步骤的优化和改进,建立起鲤鱼cDNA-AFLP反应体系。结果表明,采用MseⅠ和BstYⅠ酶切鲤鱼cDNA100ng,分别处理2h和3h后,以接头浓度分别为2pmol/μL和0.2pmol/μL、T4连接酶浓度为0.12U/μL的反应体系进行连接。以稀释50倍的预扩增产物为模板、BstYⅠ和MseⅠ比例为1：4的引物配比进行选择扩增可得到稳定的扩增结果。本研究建立的cDNA-AFLP技术将为鲤鱼转录组研究建立基础和技术支持。

关键词：cDNA-AFLP、鲤鱼、反应体系、水产动物

所属期刊栏目：30

分类号：S513(禾谷类作物)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项资金NYCYTX-49-05;公益性行业农业科研专项200903045;中央级公益性科研院所基本科研业务费201005

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：122-128