Col生态型拟南芥AP3基因启动子克隆及植物表达载体构建
隶属于MADS-Box基因家族的拟南芥花器官B类特征基因APETALA3(AP3)在花瓣和雄蕊中特异性地表达;AP3基因编码转录因子,与A类和C类特征基因协同作用控制双子叶植物花瓣和雄蕊的发育。研究表明AP3基因启动子为花特异表达启动子。因此,AP3基因启动子的克隆及功能鉴定对于园林植物与花相关的商业性状的定向改良具有重要作用。本文根据GenBank数据库报道的Ler生态型拟南芥(Arabidopsis thaliana)AP3基因启动子序列(U30729)设计了一对特异性扩增引物,基于PCR技术,用高保真的KOD-plusDNA聚合酶扩增了长度为1767bp的Col生态型拟南芥AP3基因启动子,并命名为pAtAP3,其Gen-Bank登录号为FJ619533。Bl2seq在线分析表明pAtAP3与U30729序列的相似性达98%,与Col生态型拟南芥BAC克隆T12E18(AL132971)9264~11030之间的碱基序列相似性达100%,且该段序列的下游基因编码AP3蛋白(CAB81799),说明克隆序列为Col生态型拟南芥AP3基因的启动子。PLACE在线分析表明pAtAP3具有基本的启动子元件TATA-box和CAAT-box,还包含大量与花特异表达相关的顺式元件CArG1、CArG2、CArG3和anther-box等。本试验进一步构建了植物表达载体pAtAP3::GUS,为该启动子的功能鉴定奠定了基础。
拟南芥、Col生态型、APETALA3启动子、植物表达载体构建
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Q503(一般性问题)
国家自然科学基金30740013;河南省高等学校青年骨干教师资助计划2010GGJS-075
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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