昆明小鼠胚胎干细胞建系的初步研究

摘要：

以昆明小鼠(Mus musculus)为材料,利用超数排卵获得小鼠扩展囊胚、孵化囊胚.为了研究小鼠胚胎干细胞(Mouse Embryonic Stem Cells,mESC)分离和传代的影响因素,设计两个实验:(1)不同孕期(3.5 d或4.5 d)的囊胚对胚胎干细胞分离效率的影响;(2)第5代后,不同传代方法(机械法或酶消化法)对mESC传代的影响.结果显示:在3.5 d孕期时,胚胎为扩展囊胚,在4.5 d时为孵化囊胚,扩展囊胚在贴壁率、原代克隆形成率差异不显著,从在继代培养上显著高于孵化囊胚(P<0.05);第5代后用机械法或胰酶消化法传代对mESC的维持没有明显差别,但从克隆的形态上看,酶消化法优于机械法.最后,本研究从扩展囊胚组中成功获得了一株mESC,该mESC碱性磷酸酶染色呈强阳性,经RT-PCR分析显示表达Oct4、Sox2,核型为正常40XY.

关键词：昆明小鼠、囊胚、胚胎干细胞、机械法、酶消化法

所属期刊栏目：27

分类号：Q254;Q959.837(细胞生理学)

资助基金：广西自然科学基金项目桂科自0640019

在线出版日期：2009-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：329-334