水牛胎儿成纤维细胞转染外源基因的初步研究

摘要：

研究了水牛胎儿成纤维细胞(buffalo fetal fibroblasts,BFF)转染外源基因后的细胞生物学特性.纯化含有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和新霉素抗性基因的线性化载体,用脂质体法转染体外培养3代的BFF细胞,应用抗生素G418筛选2周后挑取转基因抗性细胞集落扩大培养.结果发现:经过G418筛选后细胞增殖活力下降,胰蛋白酶消化法共分离获得162个转基因水牛阳性细胞集落,转移到24孔板扩大培养后,132个(85.2%)细胞集落可以存活,转移到4孔板中后仅有52个(32.1%)细胞集落能继续生长,最终能在35 mm培养皿中大量培养的只有15个(<9.3%).抗性细胞由梭形、成簇生长变为多角形、不规则形弥漫生长,立体感减弱,细胞生长速度减慢,活力下降.染色体核型异常率增加,10个抗性细胞集落核型正常率平均为61%,显著低于对照组86.7%(P<0.01).研究结果为建立和优化BFF细胞转染外源基因平台奠定了工作基础.

关键词：水牛胎儿成纤维细胞、转染、外源基因、核型

所属期刊栏目：27

分类号：Q256;Q952.5(细胞生理学)

资助基金：国家863计划项目2007AA100505;广西大学科研基金资助项目X071098

在线出版日期：2008-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：192-196