高抗重金属盐的微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)菌株GXCR的遗传转化
我们曾分离到一株高抗多种重金属盐的微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)菌株GXCR.本研究在该菌株中建立了基于携带苯菌灵抗性基因(Benr)的质粒pCPXBN-1、聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化体系.原生质体的产量和再生的最佳条件是酶解液中的酶浓度在0.6%~0.8%(纤维素酶∶蜗牛酶=1∶1) 、孢子萌发后培养24 h的菌体和0.05 mol/L二硫苏半糖醇(DTT)预处理.最佳转化组合条件为3×108原生质体/mL,50μg质粒DNA组合条件下,40%PEG4000,山梨糖醇(sorbitol)-三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)-氯化钙(CaCl2)缓冲液(STC)[1 mol/L sorbitol,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.0),50 mmol/L CaCl2],室温转化20 min.在此条件下的转化效率为0.3个转化子/μg DNA.
真菌、金属盐、抗性、原生质体、转化
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Q939.96(微生物学)
广西科技厅科研项目桂科能0443001-20;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地主任基金主基-07-04;微生物及植物遗传工程教育部重点实验室开放基金J0701
2008-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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